中藥化學成分及其復雜, 若要從復雜的混合物中提取對人體有效的單一中藥活性成分,使用傳統的方法很難達到高純度。但靈活綜合地應用各種層析技術，如正相層析，離子交換。分子篩，反相層析，逆流色譜，為中草藥的提取提供了一個有效的技術平臺。層析技術具有重復性好，可在線檢測，純度高，易于產業化，易于自動化，是科學研究和工藝開拓的**方法。
關鍵詞：Sephadex LH-20 Sepharose Q， Sepharose SP， Spurce15 RPC
一．應用于中草藥純化的凝膠簡介
（一）Sephadex LH-20
*內外有很多利用Sephadex LH-20 純化天然產物的文獻報道。可純化的天然產物有甙、生物堿、黃酮、內酯、多酚，有機酸及甾類等化合物。雖然Sephadex LH-20通常被認為是凝膠過濾的膠，由于它是Sephadex G-25交聯羥丙基而成。它除了具有凝膠過濾作用以外，它還同時具有吸附層析和分配層析的性質。吸附層析依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵的數量和質量；分配層析依賴于被分離化合物在流動相（溶劑）和固定相（凝膠）之間的分配，這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的?？衫玫挠袡C溶劑通常有丙酮，乙酸已酯，氯仿，三氯甲烷，和四氫呋喃等。
（二）離子交換Sepharose FF/HP Q,SP,DEAE, CM
Sepharose Fast Flow Q,SP,DEAE, CM離子交換介質是以瓊脂糖為架的離子交換介質，具有高流速加上高載量，同時具有高化學穩定性。
（三）反相層析Source RPC
Source RPC是已聚苯乙烯為基架的新一代反相填料，具有極強的化學穩定性，可耐受強酸強堿，兼容pH1－12，可用1MNaOH在位清洗和消毒，使用壽命長，疏水性和C18相近，不僅分辨率高，選擇性寬，載量高，顆粒均勻；而且高流速低反壓，非常容易放大。而一般的反相硅膠具有不耐堿，高反壓，難裝柱，不易放大的特點。
（四）硅膠
硅膠Silica正相層析是植物化學和中藥化學的主流技術，應用非常廣泛，是**經典的分離純化技術。
二．Sephadex LH－20純化中草藥有效成分
1．利用Sephadex LH-20純化黃酮類物質及黃酮甙
黃酮類化合物是泛指兩個苯環通過三個碳原子相互聯結而成的系列化合物，廣泛存在于天然植物中。在植物體內大部分與糖成甙，一部分以甙元形式存在，大多數呈黃色或淡黃色。它的生理作用也多種多樣。利用Sephadex LH-20純化黃酮類物質**經典的例子是對橙皮素，山奈酚和槲皮素的分離。
燈盞花具有治療腦血栓形成、腦栓塞、多發性神經炎等腦血管意外所致的癱瘓癥?，F在的中藥均是以其總黃酮作為藥效成分，利用Sephadex LH-20結合其它方法就可以將其四種不同的黃酮類物質分開。它們是燈盞乙素（scutellarin）、5，6，4‘-三羥基黃酮-7-0-β- D –半乳糖醛酸苷、燈盞甲素和黃芩素7-0-β- D –吡喃葡萄糖苷2。為進一步探索其生理機制奠定了基礎。另外，梁鴻和趙玉英3等人利用Sephadex LH-20將柴胡中的八種黃酮類化合物分離。它們是柴胡色原酮酸、蘆丁、槲皮異鼠李素、異鼠李素3-葡萄糖甙、葛根素、7、4’-二羥基-異黃酮-7-葡萄糖甙、色氨酸。
臺灣科學家4在Loranthus Kaoi Kiu 葉中分離出八種黃酮類物質。它們是1、兒茶素的混合物 2、表兒茶素 3、 2‘，4’，6‘-三羥基二氫黃酮4’-0-β- D-乳糖甙，4、松烯柏素-7-o-β-D- 乳糖甙 5、山奈酚-3-0-α-D- 鼠李糖甙 6、山奈酚3，7-二-0-β- D 乳糖甙 7、槲皮素3-0-α- D- 鼠李糖甙 8 、槲皮素3-0-β- D 乳糖甙。在工藝中，有兩步使用Sephadex LH-20。
下圖！為使用Sephadex LH-20純化40%大豆異黃酮的浸提混合物，一步就可得到純度90%以上的大豆異黃酮。下圖2為使用Sephadex LH-20純化紅色黃花素
3．利用Sephadex LH-20純化生物堿
生物堿是來源于植物界的一大類含氮有機化合物，大多數具有較復雜的氮雜環結構，具有廣泛的生理活性，是許多中草藥和藥用植物的有效成分。常見的即包括吡咯類、哌啶類、吲哚類、咪唑類、奎寧類、苯丙二氮卓類等。在植物中的生物堿往往是幾種或幾十種并存，且來源于同一個前體，因此，使用傳統的方法很難取得高純度的單體。但使用Sephadex LH-20可以獲得滿意的效果。
J. Labrana 和G.Choy15從Narcissus bujei 中利用Sephadex LH-20將石蒜堿和高石蒜堿有效的進行了分離。K.Schmidt 和S.Stoyanova從菌絲體中利用Sephadex LH-20有效的分離出了嘧啶堿。另外，可利用Sephadex LH-20分離五種具有鎮定、催眠效用的苯丙二氮卓類生物堿；治療各種疼痛癥的腺嘌呤17；治療肺虛久咳的腺甙浙貝寧、茄啶18及有起死回生效用的日本附子里的烏頭堿19。
4．利用Sephadex LH-20純化有機酸，多酚和醇
在中藥中常見的有機酸有檸檬酸、蘋果酸、琥珀酸、草酸等。它們在植物體內除少數以游離態存在以外，一般都與鉀、鈣、鎂等金屬離子或生物堿成鹽。使用Sephadex LH-20以丙酮作為流動相可以將琥珀酸、馬來酸和酒石酸進行分離。在Sephadex LH-20上也可分離克級量的2-乙酰胺基苯甲酸的兩個異構體20。近年來，利用Sephadex LH-20分離多酚及含多酚的有機酸報道較多，如分離茶多酚的主要成分兒茶素，在Larix decidue Mill菌根中提取多酚化合物p-羥基苯甲酸葡萄苷、p-羥苯基葡萄糖、云杉苷、兒茶素和表-兒茶素22，Ryszard Amearowicz等以甲醇為流動相從扁豆中提取抗氧化多酚活性物質，Marian Naczk等從油菜籽中提取丹寧酸23。圖3為使用Sephadex LH－20 純化迷迭香酸的圖譜。圖4為分離 白藜蘆醇的圖譜。#p#分頁標題#e#
